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FGF-23試劑盒的測試步驟是這樣子嗎？

2021-11-26 瀏覽次數(shù)：1436

　　FGF-23試劑盒是近來發(fā)現(xiàn)的相關(guān)蛋白大家族中的新成員。其基因編碼一個含250個氨基酸殘基的蛋白。FGF-23的氨基末端（aa1-24）是疏水的且很可能作為其進(jìn)入血液循環(huán)的信號肽。它的羧基末端（aa180-251）與FGF蛋白家族的其它成員僅有有限的氨基酸同源性。

　　測定人體血液中的FGF-23水平可以為不同程度的低磷血癥和高磷血癥患者的實驗室評估提供重要的診斷工具。此外，對FGF-23的靈敏測定可以為骨骼調(diào)節(jié)和礦化動態(tài)提供新的見解。用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本，例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。

　　FGF-23試劑盒的測試步驟：

　　1、待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。

　　2、酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。

　　3、洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍將洗滌液注滿板孔后，即甩去，之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

　　4、陰性對照孔每孔加入pbs50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl。

　　5、酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

　　6、洗板，同4。

　　7、每孔加1:5000稀釋的hrp-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液100μl。

　　8、酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

　　9、洗板，同4。

　　10、每孔加tmb顯色液100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。

　　11、每孔加100μl2mol/lh2so4終止反應(yīng)。